atp熒光檢測儀快速檢測活菌數的方法研究及應用，細菌總數是國內外公認的飲用水、食品、醫院及其科學研究過程中所涉及樣品的衛生細菌學指標，其測定技術在食品衛生安全及疾病防治、環境監測中廣泛應用。隨著微生物資源開發與利用，所需檢測微生物指標的樣品范圍和數量不斷擴大。目前細菌總數檢測方法主要有傳統的平板菌落計數法[1]和比濁法，其操作步驟復雜，而且需培養24?48 h方能出結果，且因培養基中營養物質有限和好氧培養條件的特點，僅有一些細菌能生長而被檢測到，其結果不能代表真正的細菌總數。近年來開發的新型檢測技術以縮短檢測時間、簡化操作、降低檢測成本、提高檢測效率等優勢而被廣泛關注[2]，如高光譜技術[3-5]、熒光定量PCR技術[6-7]、ATP生物發光技術[8-10]、流式細胞計數法[11-12]、3M測試片快速分析技術[13]、MTT法快速檢測技術[14-15]、TTC顯色法[16]、集合酶聯反應技術[17-18]、介電譜技術[19-20]等。然而這些新型方法大多是通過實驗室大型設備實現的，設備價格高，檢測條件嚴格，不易實現現場快速檢測。開發快速、便捷、靈敏的細菌總數檢測方法具有重大的現實意義。

        Calcein UltraGreen? AM是一種疏水性化合物，可輕松通過活細胞膜，熒光染料的AM基團被活細胞中存在的細胞酯酶水解切斷，在細胞內產生強熒光特性，該反應為不可逆反應，結合成功后，即使細胞死亡該熒光特性也會一直存在。然而酯酶活性與活細胞數成正比，因此，活細胞與由Calcein UltraGreen? AM催化酯酶水解產生的熒光強度直接相關。該熒光染料的光譜特性為激發波長496 nm、發射波長524 nm，染色活動物細胞的條件為染料濃度在1?10 μmol/L、37 ℃下反應5?10 min，可以將濃度為106?108 cells/mL的活動物細胞準確染色。由于該染色條件是用于染色動物細胞，目前尚未有文獻報道過應用該染料檢測活菌數，因此需要建立其針對微生物細胞的探針檢測條件。

        本研究基于新型熒光染料Calcein UltraGreen? AM的熒光特性及其在活細菌細胞內穩定的反應特性，并結合小型便捷式熒光儀，以開發兼有現場快速、便捷、靈敏的細菌總數檢測方法為目的，研究并建立一種活細菌總數快速熒光檢測法，且將方法應用于實際樣品細菌總數的測定。atp熒光檢測儀有效的檢測食品中的微生物污染狀況，降低了食品安全事故的發生，儀器能夠在市場、家庭、食堂餐廳等范疇普遍應用，儀器體積小，反響靈活度高，是食品安全檢測的便利儀器。